Rekombinantný roztok trypsínu-EDTA Swe bez fenolovej červene

Trypsín je serínová hydroláza, ktorá môže odrezať karboxylový koniec lyzínu a arginínu v polypeptidových reťazcoch. Trypsínové štiepenie sa používa pri extrakcii, kultivácii a in vitro bunkovej kultúre na hydrolýzu medzibunkových proteínov a disociáciu tkanív alebo buniek na jednotlivé bunky. Bežný trypsín sa získava z pankreasu zvierat, ako sú ošípané a kravy. Pôvod konvenčných pankreatických enzýmov a charakteristiky výrobného procesu znamenajú, že nevyhnutne obsahujú nečistoty živočíšneho pôvodu a potenciálnu vírusovú kontamináciu. Tento produkt používa rekombinantný prasačí trypsín na nahradenie konvenčného trypsínu. Vo výrobnom procese sa nepoužívajú žiadne suroviny pochádzajúce zo zvierat a čistota a životaschopnosť rekombinantného prasačieho trypsínu je zabezpečená prostredníctvom viacerých kôl čistenia. To mu umožňuje nielen nahradiť funkciu konvenčného trypsínu, ale môže sa použiť aj na trávenie špeciálnych buniek alebo tkanív, kde sa striktne vyžaduje bezživočíšny pôvod. Produkt navyše obsahuje EDTA, žiadne indikátory fenolovej červene.

Loď s mokrým ľadom; Skladujte pri 4 stupňoch od svetla po dobu 12 mesiacov. Ak sa výrobok krátkodobo nepoužíva, odporúča sa skladovať pri -20 stupňoch dlhší čas.

Poznámka: Nasledujúce protokoly sa používajú hlavne pre adherentné bunky. Na trávenie tkaniva je potrebné tkanivo najskôr narezať na vhodné veľkosti. Čas potrebný na trávenie sa značne líši od tkaniva k tkanivu a zvyčajne sa odporúča, aby boli tkanivá po strávení dostatočne rozbité.

1. Odstráňte pôvodné bunkové kultivačné médium a premyte bunky 1-2-krát PBS, bezsérovým médiom alebo inými tlmivými roztokmi, aby ste odstránili zvyškové sérum.

2. Pridajte vhodné množstvo rekombinantného roztoku na štiepenie trypsínom na pokrytie buniek a digesciu pod mikroskopom pozorujte, čas trávenia väčšiny buniek je medzi 30 s-3 min; v prípade nestráviteľných buniek sa môže umiestniť do inkubátora bunkovej kultúry na štiepenie na určitý čas (čas trávenia je len orientačný, konkrétny čas trávenia by sa mal určiť podľa skutočnej situácie).

3. Keď bunky vykazujú významné zmrštenie alebo morfologické zmeny, odsajte rekonštituovaný trypsínový digest a pridajte primerané množstvo bunkového kultivačného média obsahujúceho sérum na ukončenie štiepenia (ak sa bunky ťažko uvoľňujú z dna platne pri jemnom prefúknutí pipetou, znamená to, že čas trávenia je nedostatočný a trávenie možno obnoviť pridaním trypsínového bunkového trávenia. Vyhnite sa nadmernému tráveniu).

4. Bunkovú suspenziu odoberte do centrifugačnej skúmavky, centrifugujte pri 800-1200 ot./min. počas 3-5 min., pridajte príslušné množstvo bunkového kultivačného média obsahujúceho sérum (voliteľné).

5. Bunky jemne prefúknite, aby sa vytvorila bunková suspenzia, ktorá sa môže použiť na pasážovanie alebo následné experimenty.

1. Tento produkt možno priamo použiť na trávenie buniek pri 4 stupňoch. Teplotu trávenia je možné podľa potreby zvoliť pri izbovej teplote alebo v inkubátore, ale nepredhrievajte produkt priamo na 37 stupňov. Opakovaný nárast a pokles teploty má určitý vplyv na aktivitu enzýmov.

2. Po prijatí môže byť produkt skladovaný v porciách podľa potreby; ak je potrebné skladovať pri -20 stupňoch , vyhnite sa opakovanému zmrazovaniu a rozmrazovaniu.

3. Čas trávenia sa medzi bunkovými líniami alebo tkanivami líši, preto skontrolujte optimálny čas trávenia, aby ste sa vyhli príliš dlhému tráveniu, ktoré môže ovplyvniť aktivitu a stav buniek.

4. Tento produkt je aseptický a je určený na použitie a bol testovaný na mykoplazmu a endotoxín. Počas používania dbajte na aseptickú prevádzku.

5. V záujme vášho zdravia a bezpečnosti noste pri práci laboratórny plášť a rukavice.

Len na výskumné účely!

Populárne Tagy: swe rekombinantný roztok trypsín-edta bez fenolovej červene, Čína swe rekombinantný roztok trypsín-edta bez fenolovej červene výrobcovia, dodávatelia, továreň