Rekombinantná HRV 3C proteáza (His-tag)

Rekombinantná proteáza HRV 3C je rekombinantná cysteínová proteáza z ľudského rinovírusu typu 14 3C s His tagom exprimovaným v Escherichia coli. HRV 3C proteáza štiepi rozpoznávacou sekvenciou LEVLFQGP (LeU-Glu-Val-Leu-Ph-Gln-Gly-Pro) alebo jadrom pentapeptidovej sekvencie LFQGP (Leu-Ph-Gln-Gly-Pro) pri nízkej teplote medzi Q ( Gln) a GP (Gly-Pro) zvyšky. Vďaka vysokej špecifickosti a aktivite proteázy je stále aktívna aj pri nízkej teplote 4 stupne.

Aplikácia: Odstráňte MBP, GST, His alebo iné tagové proteíny z fúznych proteínov naviazaním HRV 3C proteázy, ktorá obsahuje His tag, na niklový stĺpec.

Zdroj: Proteáza ľudského rhinovírusu typu 14 3C, rekombinantná exprimovaná v Escherichia coli, obsahujúca His tag.

Enzýmová aktivita: Je definovaná ako jedna aktívna jednotka na štiepenie viac ako 90 % 100 ug substrátu (proteín obsahujúci štiepne miesto HRV 3C proteázy) v priebehu 16 hodín pri 4 stupňoch, pH 7,5.

Inaktivácia alebo inhibícia: Aktivita HRV 3C proteázy bola inhibovaná 100 mM ZnCl2, 4 mM AEBSF a 100 uM chymostatínom.

Čistota a koncentrácia: Čistota Vyššia alebo rovná 95 % podľa SDS-PAGE, 2 U/μl.

Skladovací roztok rekombinantnej HRV 3C proteázy: 50 mM Tris-HCl, 150 mM NaCI, 1 mM EDTA, 1 mM DTT, 50 % (obj./obj.) glycerol, pH 8,0.

10 x HRV 3C pufor: 500 mM Tris-HCl, 1,5 M NaCI, 10 mM EDTA, 10 mM DTT, pH 7,5.

Loď s mokrým ľadom; Skladujte pri -20 stupňoch, platnosť 12 mesiacov.

1. Odporúčaný systém trávenia proteázy:

2. Umiestnite na 4 stupne cez noc alebo na 16 hodín;

3. Odstráňte 10 μl produktu štiepenia enzýmom na elektroforézu SDS-PAGE, aby ste vyhodnotili množstvo enzýmového štiepenia a reakčné podmienky.

1. Enzýmové produkty by sa mali pri použití vložiť do ľadového boxu alebo ľadového kúpeľa a skladovať oddelene pri -20 stupňoch ihneď po použití;

2. Pre vašu bezpečnosť a zdravie noste ochranné okuliare, rukavice alebo ochranný odev.

Príklady aplikácií na trávenie enzýmov

Obrázok 1: Účinok štiepenia kontrolného substrátového proteínu HRV 3C proteázou (fúzny proteín A+B, ktorý obsahuje miesto rezania proteázovým enzýmom HRV 3C) (reštrikčné podmienky sú 30 stupeň, pH 7,5, 0 min, 10 min. , 20 min, 30 min, 1 h, 2 h, v tomto poradí, čo zodpovedá dráhe: 1-6, hmotnostný pomer pridaného substrátu k enzýmu v enzymatický tráviaci systém je 10:1)

Len na výskumné účely!

Populárne Tagy: rekombinantná proteáza hrv 3c (his-tag), Čína rekombinantná proteáza hrv 3c (his-tag), výrobcovia, dodávatelia, továreň