0,25 % trypsín (rozpustný v D-Hankovej, EDTA, bez fenolovej červene)

Trypsín, skrátene trypsín, je serínová hydroláza, ktorá oddeľuje karboxylové konce lyzínových a arginínových zvyškov v polypeptidových reťazcoch. V procese extrakcie, kultivácie a bunkovej kultúry in vitro sa roztok na štiepenie trypsínom používa na hydrolýzu medzibunkových proteínov, takže tkanivo alebo bunka môžu byť rozptýlené do jedinej bunky. Tráviaca schopnosť trypsínu bola najsilnejšia pri 37 stupňoch pH 8.0. Bežná pracovná koncentrácia trypsínu je 0,25 %. EDTA môže chelátovať ióny vápnika a horčíka. Použitie EDTA v roztoku trypsínu môže urýchliť hydrolýzu medzibunkových spojovacích proteínov a zlepšiť trávenie. Fenolová červeň je indikátor pH. Roztok je purpurovočervený, keď je zásaditejší, oranžovočervený, keď je kyslejší, a ružový, keď je takmer neutrálny.

Tento produkt je {{0}},25% roztok na štiepenie trypsínom, obsahujúci 0,25% trypsín, rozpustený v Hankovom pufri, obsahujúci 0,9 mM EDTA, bez fenolovej červene indikátor, sterilizovaný 0,1 μm filtráciou.

Preprava suchým ľadom; Skladujte pri -20 stupňoch, platnosť 12 mesiacov. Vyhnite sa opakovanému zmrazovaniu a rozmrazovaniu.

Adherentné bunky

1. Odsajte bunkové kultivačné médium a premyte bunky sterilným PBS, Hanksovým roztokom alebo kultivačným médiom bez séra, aby ste odstránili zvyšné sérum.

2. Pridajte primerané množstvo tohto produktu na pokrytie buniek a nechajte ho stáť na trávenie 1-5 min pri izbovej teplote.

3. Keď sa pod mikroskopom objaví zjavná kontrakcia buniek, je ľahšie bunky sfúknuť jemným vyfúknutím pomocou pipety. Potom sa roztok na štiepenie buniek trypsínom odstráni odsatím a pridá sa médium na kultiváciu buniek obsahujúce sérum, aby sa bunky jemne sfúkli, aby sa vytvorila bunková suspenzia, ktorá sa môže priamo subkultivovať. Ak je ťažké odstrániť bunky zo spodnej časti platne pri jemnom prefúknutí pipetou, čo naznačuje nedostatočný čas trávenia, znovu ich trávte pridaním roztoku na štiepenie buniek trypsínom. Nepretrávte sa.

1. Vzhľadom na odlišné vlastnosti tkanív alebo buniek by mal experimentátor určiť najlepší čas trávenia podľa konkrétnej situácie; Čas trávenia buniek by nemal byť príliš dlhý, inak bude ovplyvnená adhézia a rast buniek.

2. Tento výrobok neobsahuje bakteriostatické činidlo. Osobitná pozornosť by sa mala venovať aseptickej prevádzke počas používania, aby sa zabránilo kontaminácii tráviacich štiav mikroorganizmami.

3. Tento výrobok by sa nemal skladovať pri 4 stupňoch po dlhú dobu, aby sa predišlo opakovanému zmrazovaniu a rozmrazovaniu. Odporúča sa rozdeliť na malé časti a uložiť pri -20 stupňoch .

4. Na selekciu EDTA a fenolovej červene v pankreatických enzýmoch možno podľa experimentálnych potrieb vybrať pre všeobecné nádorové bunky roztok na štiepenie trypsínom obsahujúci EDTA. Pre citlivejšie a zraniteľnejšie bunky, ako sú primárne bunky a ľahko stráviteľné bunky, zvoľte roztok na trávenie trypsínom bez EDTA. Ak sú bunky obzvlášť citlivé, vyberte roztok na trávenie trypsínu s nižšou koncentráciou trypsínu. Ak je potrebné zistiť apoptózu prietokovou cytometriou, mal by sa použiť roztok na štiepenie trypsínom bez EDTA.

6. Pre vašu bezpečnosť a zdravie noste pri prevádzke laboratórny plášť a jednorazové rukavice.

Populárne Tagy: {{0}},25 % trypsín (rozpustný v d-hank's, edta, bez fenolovej červene), Čína 0,25 % trypsín (rozpustný v d-hank's, edta, bez fenolovej červene) výrobcovia, dodávatelia, továreň